抗HBc-ScFv基因复制缺陷型腺病毒载体的构建及其体外表达

• 作者: 余永胜 姚集鲁 李刚 汤正好 臧国庆 马会慧
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗HBc ScFv基因 复制缺陷型 重组腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 734-738
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 5316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2005.06.008

摘要

目的:构建表达抗乙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体(抗HBc ScFv)的复制缺陷型腺病毒载体,并检测其能否在真核细胞中有效表达目的基因.方法:采用DNA重组技术将特异性人源性抗HBc单链抗体基因克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与5型腺病毒骨架质粒pAdeasv-1共转染BJ5183细菌,经细菌内同源重组产生携带抗HBc ScFv基因的重组腺病毒载体pAd-ScFv,经脂质体法转染293细胞,包装产生携带抗HBc ScFv基因的重组腺病毒Ad-ScFv,体外转染HepG2细胞,PCR和ELISA法检测目的基因及其表达.结果:构建了表达抗HBc ScFv基因的复制缺陷型腺病毒,病毒滴度达4×1015PFU/L,并能在真核细胞中有效表达目的基因.结论:成功构建表达抗HBc ScFv的复制缺陷型腺病毒载体,为进一步开展抗HBc ScFv在抗HBV基因治疗中的作用研究提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中山大学附属第三医院传染科实验室	161	954	13.0	23.0
2	汤正好	上海交通大学附属第六人民医院感染科	85	349	10.0	14.0
3	姚集鲁	中山大学附属第三医院传染科实验室	75	382	10.0	16.0
4	臧国庆	上海交通大学附属第六人民医院感染科	119	570	13.0	18.0
5	余永胜	上海交通大学附属第六人民医院感染科	86	301	9.0	12.0
6	马会慧	中山大学附属第三医院传染科实验室	22	85	6.0	7.0