表达Cre酶复制缺陷型重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘力 张云 李文辉 杨帆 段素素 王树惠 王颖
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: Cre重组酶 Cre-loxP条件性基因打靶 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 593-596
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2006.06.007

摘要

目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择.方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;Western blot方法鉴定Cre蛋白的表达.结果在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白.结论表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进,为进一步的体细胞Cre-loxP条件性基因敲除提供了基础.