小鼠Sim2真核表达载体的构建及其对PC12细胞周期的影响

• 作者: 刘晓春 孟宪芳 彭彬 施静 李伶俐
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,Sim2 PC12细胞 细胞周期 唐氏综合征
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1096-1098
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.06.013

摘要

目的:构建小鼠Sim2(mSim2)真核表达载体,并观察其对PC12细胞周期的影响,以初步阐明Sim2基因在Down综合征发病机制中的作用.方法:以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法从新生小鼠大脑中扩增mSim2全长阅读开放框(ORF),定向克隆入真核表达载体pcDNA3中.以脂质体法瞬时转染PC12细胞;RT-PCR方法检测mSim2基因在PC12细胞的表达;流式细胞仪观察mSim2对细胞周期的影响.结果:DNA测序结果表明,mSim2成功克隆入真核表达载体pcDNA3中.RT-PCR结果显示,瞬时转染的PC12细胞中有明显的mSim2表达.流式细胞仪检测发现,转染mSim2后,处于G0/G1期的PC12细胞百分比明显升高(P＜0.01),而G2/M期百分比明显低于对照组和空载体组(P＜0.01).结论:Sim2基因可能通过抑制神经元前体细胞的增殖参与Down综合征的发生;Sim2真核表达载体的构建为进一步研究该基因的功能奠定了良好的基础.