人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 仲人前 周晔 曹伟娟 朱烨 杨再兴 梁艳 王燕 窦恒利 钱(王争) 陆慧琦
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: BAFF APRIL TACI BR3 融合蛋白 真核表达
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1190-1195
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5006字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.11.009

摘要

目的:构建人双受体融合基因真核表达载体--pcDNA3.1(+)-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况.结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性.结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础.