Id3启动子/荧光素酶基因载体的构建及其在WEHI-231细胞中的活性表达

• 作者: 李晓军 水口纯一郎 秦喜九美
• 来源期刊: 南京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 分化抑制因子(Id) B细胞抗原受体(BCR) WEHI-231细胞 抗IgM抗体
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 页码范围: 176-183
• 页数: 8页
• 分类号: Q2
• 字数: 3764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0469-5097.2006.02.009

摘要

用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增小鼠Id3(mId3)基因5'端含启动子序列的不同长度的DNA片段(mId3-pf)亚克隆至荧光素酶(Luc)报道基因载体PGV-B2,构建由mId3基因启动子片段控制的Luc报道基因重组载体mId3-pf/PGV-B2.用电穿孔术将mId3-pf/PGV-B2导入培养的WEHI-231细胞,用抗小鼠IgM抗体刺激转染后的WEHI-231细胞,24 h后测定胞内Luc活性.结果表明,4种Luc报道基因重组载体转染细胞均表现较高的mId3启动子活性,与空载体转染细胞相比,启动子活性分别升高25～60倍.抗IgM抗体刺激细胞后,Id3启动子活性较未刺激细胞均呈明显增高趋势,增高幅度可达2倍左右.表明抗IgM抗体诱导WEHI-231细胞Id3的上调表达与Id3转录活性的升高有关.