猪IGF-Ⅰ基因荧光定量PCR标准曲线的建立

• 作者: 刘保国 张嘉保 张树敏 戴立胜 李毅 李爽 肖书奇 赵中利 赵志辉 高妍
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 胰岛素样生长因子-Ⅰ Taqman探针 荧光定量RT-PCR 标准曲线
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 分类号: Q95
• 字数: 4559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2006.06.020

摘要

目的:建立用荧光定量PCR方法检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.方法:根据自己克隆的猪IGF-Ⅰ(GenBankNo.DQ784687)基因mRNA序列,设计合成引物和探针,采用Taqman探针荧光定量RT-PCR的检测方法,构建检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.结果:由pMD-18TIGF-Ⅰ所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×102～1×106拷贝猪IGF-Ⅰ基因分子时,扩增反应Ct值与拷贝数的对数呈线性关系)、灵敏度高(可检测出低于10个拷贝/μL的样品)、特异性强、准确可靠.结论:成功构建了用荧光定量RT-PCR方法检测猪IGF-Ⅰ基因表达量的标准曲线.