结核分枝杆菌ESAT-6抗原真核表达质粒的构建及其免疫原性

• 作者: 吴少庭 张仁利 林绮萍 温见翔 秦莉 袁仕善 陈群 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌,结核 ESAT-6 疫苗,DNA 免疫原性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: R51
• 字数: 4125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1000-6680.2006.01.003

摘要

目的构建结核分枝杆菌抗原ESAT-6的真核表达质粒,并研究其免疫原性.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法自结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增esat-6基因片段,定向亚克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-esat-6重组质粒;利用脂质体介导的转染技术,将其导入Vero E6细胞,RT-PCR法检测mRNA表达情况,Western-blot法鉴定表达产物;重组质粒经基因枪免疫小鼠后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清抗ESAT-6特异性抗体以及小鼠脾淋巴细胞培养上清液干扰素-γ(IFN-γ)含量.结果成功构建了真核表达重组质粒pVAC-esat-6,并可在VeroE6细胞中表达;重组质粒免疫小鼠3次后,抗体滴度达到了1:1600,重组质粒组(pVAC-esat-6组)小鼠脾淋巴细胞培养上清液IFN-γ水平明显高于对照组(pVAC组)(P＜0.01).结论成功构建结核分枝杆菌抗原ESAT-6的真核表达质粒pVAC-esat-6,免疫小鼠后诱导产生了特异的体液免疫应答和细胞免疫应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利	深圳市疾病预防控制中心分子生物学实验室	192	798	13.0	17.0
2	高世同	深圳市疾病预防控制中心分子生物学实验室	137	593	11.0	15.0
3	吴少庭	深圳市疾病预防控制中心分子生物学实验室	72	281	9.0	12.0
4	林绮萍	华南农业大学兽医学院预防兽医学教研室	7	15	2.0	3.0
5	秦莉	华中科技大学同济医学院分子生物学教研室	20	82	6.0	8.0
6	袁仕善	深圳市疾病预防控制中心分子生物学实验室	20	86	5.0	8.0