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摘要:
为了得到可溶性重组猪瘟病毒E0蛋白并便于观察重组蛋白的表达情况,将增强型水母绿色荧光蛋白基因(EGFP)与E0基因相连插入昆虫杆状病毒转移载体中,与线性杆状病毒DNA共转染Sf9细胞后通过噬斑纯化得到纯的重组杆状病毒,将其感染Sf9细胞制备P1种子液,同时用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况,剔除表达效果差的重组杆状病毒.再用P1种子液感染Sf9细胞制备高效价的P2种子液.通过病毒液的梯度稀释和噬斑测定,确定P2种子液的病毒滴度达1.14×107pfu/mL.将P2种子液以MOI5~10接种指数期Sf9细胞,3 d后呈现出最强的荧光.重组杆状病毒在Sf9细胞中的初步成功表达为进一步制备重组E0糖蛋白,研究E0蛋白的结构与功能、免疫诊断新方法和猪瘟基因工程疫苗奠定基础.
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文献信息
篇名 构建表达猪瘟病毒E0基因的重组杆状病毒
来源期刊 上海农业学报 学科 农学
关键词 猪瘟病毒 E0蛋白 增强型水母绿色荧光蛋白 重组杆状病毒
年,卷(期) 2006,(1) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 10-13
页数 4页 分类号 S852.65+1
字数 3724字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-3924.2006.01.003
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研究主题发展历程
节点文献
猪瘟病毒
E0蛋白
增强型水母绿色荧光蛋白
重组杆状病毒
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
上海农业学报
双月刊
1000-3924
31-1405/S
大16开
上海市金齐路1000号
4-523
1985
chi
出版文献量(篇)
3306
总下载数(次)
8
总被引数(次)
23408
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