炭疽中性蛋白酶部分片段的重组表达、纯化及免疫效果研究

• 作者: 吴秀芳 张松乐 武素琴 王希良 罗德炎 谢应国
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 炭疽杆菌 中性蛋白酶 蛋白表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 289-292
• 页数: 4页
• 分类号: R392.9
• 字数: 3682字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2006.04.006

摘要

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白(位于248～532氨基酸),并对其免疫效果进行研究;设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N,T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a(+)-N,通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性.以Al(OH)3为佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法测血清总IgG水平,MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖,采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类;Western blot显示重组蛋白具有免疫原性,rN免疫BALB/c小鼠后,ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生;T淋巴细胞亚群试验表明,重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主;MTT试验表明,rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力,说明该重组蛋白具有生物学活性.纯化的rN可诱导高水平的抗体反应,为进一步的功能研究奠定了基础.