蛇毒锯鳞蝰素融合蛋白的发酵与纯化

• 作者: 杨利军 杨涛 杨琦 牛勃 王国亮 程牛亮 解军
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛇毒锯鳞蝰素 大肠杆菌 发酵 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 95-98
• 页数: 4页
• 分类号: Q815
• 字数: 3419字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2006.01.020

摘要

研究大肠杆菌表达重组蛇毒锯鳞蝰素(Echistatin,Ecs)融合蛋白的发酵和纯化工艺.将Ecs基因插入表达载体pTXB1,转化E.coli BL21(DE3)构建工程菌.对工程菌进行补料分批培养并诱导表达,研究培养基、培养和诱导时间对工程菌生长和目的蛋白表达的影响,几丁质亲和层析纯化Ecs融合蛋白,经DTT裂解后,检测Ecs活性.发酵后菌体湿重可达75g/L,融合蛋白表达量约占总蛋白的35%,重组质粒在BL21宿主菌中传代稳定.亲和层析纯化后,得到Ecs单体,得率为28mg/L发酵液.生物学活性分析显示,重组Ecs能有效抑制血小板的聚集,其活性与天然Ecs相似.优化了Ecs融合基因工程菌的发酵和纯化条件,为规模化生产奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程牛亮	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	98	448	11.0	16.0
2	牛勃	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	129	688	13.0	20.0
3	解军	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	142	537	11.0	15.0
4	杨涛	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	102	335	10.0	13.0
5	杨利军	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	48	218	7.0	13.0
6	杨琦		130	1098	18.0	27.0
7	王国亮		6	11	2.0	3.0