美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化

• 作者: 丛晓燕 吴家强 张祯涛 曹帅 李俊 王文志 王金宝 赵鸿雁
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型 欧洲型 N蛋白抗原多肽 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 76-80
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2006.11.021

摘要

对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究.将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coli BL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上.将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coli M15细胞中表达了重组蛋白His-N.超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上.Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别.纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础.