慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率

• 作者: 何徐彭 孙海英 徐开林 李振宇 潘秀英 鹿群先
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 内部启动子 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 448-450,499
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3685.2006.05.019

摘要

目的在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)慢病毒载体中引入三种不同的内部启动子来驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达,初步比较内部启动子的效率.方法慢病毒载体三质粒系统中,转移质粒的构建采用限制性内切酶酶切、T4 DNA连接酶连接方法和内切酶酶切鉴定.磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T包装细胞.病毒滴度的测定采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数GFP阳性细胞.通过荧光显微镜观察绿色荧光的表达情况判断启动子的效率.结果构建了含PPT元件和含不同内部启动子和GFP的质粒.转染293T细胞后均观察到较强的绿色荧光.表达荧光的293T细胞数以巨细胞病毒(CMV)启动子最多,肝细胞特异性启动子(LSP)较少,泛醌启动子(PUB)介于两者之间.CMV为内部启动子的慢病毒载体滴度5×106 IU/ml,其他二种启动子的滴度(1～2)×105 IU/ml.结论在所选择的三种内部启动子中,CMV启动子的效率最高,LSP较强,PUB介于两者之间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何徐彭	徐州医学院附属医院血液病科	39	188	7.0	12.0
2	潘秀英	徐州医学院附属医院血液病科	123	539	10.0	18.0
3	鹿群先	徐州医学院附属医院血液病科	68	283	8.0	13.0
4	孙海英	徐州医学院附属医院血液病科	40	167	6.0	11.0
5	李振宇	徐州医学院附属医院血液病科	88	507	11.0	18.0
6	徐开林	徐州医学院附属医院血液病科	207	750	11.0	19.0