人骨形态发生蛋白2重组腺病毒载体的构建及其生物学活性检测

• 作者: 吕荣 孟国林 廉凯 李丹 李立文 白建萍 胡蕴玉
• 来源期刊: 临床骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒载体 骨形态发生蛋白质类 转染 骨髓基质细胞
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 实验与临床
• 页码范围: 356-359
• 页数: 4页
• 分类号: R341|R977.6|R394|R336
• 字数: 4154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0287.2006.04.032

摘要

目的 构建人骨形态发生蛋白2(hBMP-2)重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2),并检测其转染后的骨髓基质细胞hBMP-2表达以及成骨能力的改变.方法 采用Cre-lox重组方法构建含有hBMP-2基因的复制缺陷型重组腺病毒,并利用原位杂交和免疫组化手段观察转染后的骨髓基质细胞hBMP-2 mRNA和蛋白表达情况;通过Ⅰ型胶原原位杂交、碱性磷酸酶测定、透射电镜观察以及裸鼠肌袋试验评价Ad-hBMP-2转染对兔骨髓基质细胞成骨能力的影响.结果 病毒培养上清液的聚合酶链式反应证实构建的重组腺病毒含有Ad-hBMP-2基因,重组腺病毒滴度达3.8×1010pfu/L;感染增殖率为100的Ad-hBMP-2转染兔骨髓基质细胞24 h和48 h后即可分别检测到显著的hBMP-2 mRNA和蛋白表达,转染效率几乎达100%;Ad-hBMP-2转染可以明显刺激兔骨髓基质细胞Ⅰ型胶原mRNA表达、碱性磷酸酶分泌、细胞内蛋白质合成以及异位骨形成等.结论 Ad-hBMP-2具有高效转染能力,并能够诱导骨髓基质细胞向成骨细胞转化,进而促进骨形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕荣	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	136	1198	16.0	24.0
2	胡蕴玉	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	264	2346	22.0	29.0
3	李丹	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	87	610	14.0	20.0
4	李立文	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	30	110	5.0	7.0
5	孟国林	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	102	688	14.0	19.0
6	白建萍	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	52	509	14.0	19.0