嗜热子囊菌光孢变种cbh1基因的cDNA克隆及在毕赤酵母的高效表达

• 作者: 张玉芹 李多川 杜欣可 陈静
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜热子囊菌光孢变种 外切纤维二糖水解酶 cDNA克隆 RACE 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 406-411
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.03.021

摘要

以嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)总RNA为模板,通过RT-PCR克隆出外切纤维二糖水解酶基因cbh1片段,采用RACE方法获得全长cDNA克隆,其全长为1 710bp,编码一种由457个氨基酸组成的单肽,推导的氨基酸序列中1～19位为信号肽序列,GenBank的登录号为AY840982.将该片段克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达重组质粒pPIC9K/cbh1,转化毕赤酵母GS115,所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,筛选出一重组子GSp-15,经144 h诱导后,外切纤维二糖水解酶表达量为1.17 mg/mL,产酶活力为20.3 U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李多川	山东农业大学植物保护学院环境生物系	73	827	17.0	23.0
2	陈静	山东农业大学植物保护学院环境生物系	13	163	6.0	12.0
3	张玉芹	山东农业大学植物保护学院环境生物系	2	88	2.0	2.0
4	杜欣可	山东农业大学植物保护学院环境生物系	1	11	1.0	1.0