真核表达载体pEGFP-VASP-lC的构建及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 张京伟 张利军 彭小春 文显梅 李华 王婷婷 魏蕾
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 血管扩张刺激磷蛋白 真核表达载体 HeLa细胞 表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 421-424,封二
• 页数: 5页
• 分类号: R730.23
• 字数: 3248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8852.2006.04.002

摘要

目的:构建真核表达载体pEGFP-VASP-lC并稳定转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,为进一步探讨VASP-lC区介导的VASP的寡聚化在HeLa细胞迁移中的作用奠定基础.方法:用RT-PCR技术从人内皮细胞株ECV304细胞中获得VASP-lC区的cDNA并将其插入表达载体pEGFP-C1中,构建的重组质粒经脂质体介导转染HeLa细胞,Western blot鉴定VASP-lC区在HeLa细胞中的稳定表达.结果:RT-PCR成功地扩增出一条约310bp的片段,经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,荧光显微镜下观察到稳定转染的细胞发出较强绿色荧光,Western blot证明人VASP-lC区能以融合蛋白的形式在HeLa细胞中稳定表达.结论:成功构建了真核表达载体pEGFP-VASP-lC,获得了稳定表达人VASP-lC区基因的HeLa细胞克隆,便于进一步探讨VASP-lC区介导的VASP的寡聚化在HeLa细胞迁移中的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏蕾	武汉大学医学院病理生理学教研室	49	306	8.0	15.0
2	李华	武汉大学医学院病理生理学教研室	74	851	14.0	27.0
3	张京伟	武汉大学中南医院肿瘤外科	26	155	7.0	11.0
4	王婷婷	武汉大学医学院病理生理学教研室	13	80	5.0	8.0
5	彭小春	武汉大学医学院病理生理学教研室	5	29	2.0	5.0
6	张利军	武汉大学医学院病理生理学教研室	5	40	2.0	5.0
7	文显梅	武汉大学医学院病理生理学教研室	3	23	1.0	3.0