重组大鼠14-3-3γ蛋白在大肠杆菌中的融合表达与分离纯化

• 作者: 何明 周复辉 彭少君
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组14-3-3γ蛋白 原核表达 GST-融合蛋白 分离纯化 多克隆抗体 大鼠
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 58-60
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2449字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.01.022

摘要

目的:利用分子克隆技术在原核细胞中研究14-3-3γ融合蛋白的表达及分离纯化.方法:采用RT-PCR法从大鼠心肌组织中扩增14-3-3γ cDNA编码区,并将其重组于谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒pGEX-KG中,免疫印迹法检测表达产物.结果:经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达,表达产物的蛋白量约为菌体总蛋白的27.08%,相对分子质量为56 000左右.能与抗鼠14-3-3γ多克隆抗体特异性结合.结论:表明成功构建了GST-14-3-3γ融合蛋白载体,在大肠杆菌中有高效表达,并具有良好的免疫反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭少君	宜春学院医学院生物化学与分子生物学教研室	12	24	3.0	4.0
2	何明	江西医学院药理学教研室	23	215	8.0	14.0
3	周复辉	宜春学院医学院生理学教研室	8	35	3.0	5.0