牛分支杆菌MPT83基因的表达及重组蛋白的纯化

• 作者: 宋延华 罗满林 邹潍力 鲁俊鹏
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛分支杆菌 MPT83基因 克隆 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 366-370
• 页数: 5页
• 分类号: S852.618|Q786
• 字数: 4510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.05.006

摘要

从牛分支杆菌培养物中抽提总DNA,扩增了MPT83基因,并克隆入pMD 18-T SimpleVector,将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,用亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化.经测序,构建的克隆质粒pMD-MPT83与GenBank中的序列一致;构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamH Ⅰ+HindⅢ双酶切鉴定构建正确;经SDS-PAGE分析,在约42 ku处出现新的蛋白条带,4 h后表达量即达到高峰;Westernblotting分析表明,融合蛋白能够被牛分支杆菌阳性血清所识别;纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳,出现清晰的单一条带.表明MPT83基因原核表达载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗满林	华南农业大学兽医学院	111	453	11.0	14.0
2	鲁俊鹏	华南农业大学兽医学院	15	75	5.0	8.0
3	邹潍力	华南农业大学兽医学院	7	90	5.0	7.0