高SO2产量啤酒酵母工业菌株的构建

• 作者: 何秀萍 刘楠 张博润 曲娜 郭雪娜
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 二氧化硫产量 MET14基因 克隆与表达 酿酒酵母
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传学和分子生物学
• 页码范围: 38-42
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|Q815
• 字数: 3197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2006.01.009

摘要

二氧化硫在啤酒中具有抗氧化的重要功能,而在其形成过程中APS激酶(MET14编码)起着非常重要的作用.以二氧化硫产量较高的青岛啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSF-5的总DNA为模板,用PCR方法克隆得到MET14基因.为使目的基因在酿酒酵母中表达,以大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体,以PGK1强启动子为调控元件,构建了重组表达质粒pPM,并转化酿酒酵母YS58.转化子在YNB添加亮氨酸、组氨酸和色氨酸的选择性培养基上筛选鉴定,盐酸副玫瑰苯胺法测得转化子的SO2产量是受体菌的2倍左右.在重组表达质粒pPM的基础上添加铜抗性标记基因构建了重组表达质粒pCPM,并转化青岛啤酒工业酵母菌株YSF-38,转化子在YEPD+4mmol/L CuSO4的选择性培养基上筛选鉴定,实验室条件下培养后,测得转化子YSF-38(pCPM)的SO2产量是受体菌的3.2倍.用该转化子在青岛啤酒厂进行小型发酵实验,结果表明在发酵结束时,YSF-38(pCPM)转化子的SO2产量是受体菌的1.4倍.因此,MET14基因的有效表达可以提高啤酒工业酵母的SO2产量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何秀萍	中国科学院微生物研究所	53	769	15.0	25.0
2	曲娜	中国科学院微生物研究所	3	28	2.0	3.0
6	张博润	中国科学院微生物研究所	71	1224	18.0	31.0
7	郭雪娜	中国科学院微生物研究所	23	326	10.0	17.0
8	刘楠	中国科学院微生物研究所	15	173	9.0	13.0