新基因PCIA1真核表达载体的构建及HeLa细胞稳定转染株的建立与鉴定

• 作者: 严飞 彭枫 王国庆 王瑞 邓洪新
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: PCIA1 载体构建 转染
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 335-338
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.03.001

摘要

目的构建人的新基因( PCIA 1)的真核表达载体,并将其载体稳定转染到HeLa细胞株中.方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA为模板,通过RT-PCR扩增 PCIA 1基因编码区cDNA, 并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组质粒pcDNA- PCIA 1,重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将该表达载体导入到HeLa细胞中, 经G418筛选并建立稳定的转染细胞株,用RT-PCR和Western blot检测 PCIA 1基因在HeLa细胞中的表达.结果经RT-PCR及Western blot检测,证实真核表达重组质粒pcDNA- PCIA 1构建成功, PCIA 1基因已经稳定转染到了HeLa细胞中并表达PCIA1蛋白.结论成功建立了人新基因 PCIA 1的稳定转染细胞株,为进一步研究 PCIA 1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑞		1	2	1.0	1.0
2	邓洪新		1	2	1.0	1.0
3	王国庆		1	2	1.0	1.0
4	严飞		1	2	1.0	1.0
5	彭枫		1	2	1.0	1.0