重组大肠杆菌共表达D-海因酶和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶

• 作者: 丛进阳 李强 胡晓佳
• 来源期刊: 过程工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: D-海因酶 N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶 多顺反子 大肠杆菌 共表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 生化工程专栏
• 页码范围: 948-953
• 页数: 6页
• 分类号: Q7|Q8|TQ464
• 字数: 4187字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1009-606X.2006.06.018

摘要

通过PCR分别扩增得到N-carbamoylase基因和上游带有RBS区的D-hydantoinase基因,并将其依次克隆入pBAD/His A质粒中,得到呈多顺反子结构的双酶表达质粒pBAD-CRH,转化E.coli Top10F'得到重组菌TaraCRH.实验证明,E.coli TaraCRH对外源蛋白的表达控制严紧,而加入阿拉伯糖诱导后可以成功表达两酶基因.诱导条件优化结果表明,诱导温度采用29℃,培养基中阿拉伯糖浓度0.05 g/L可达到最高酶活.进一步尝试采用玉米浆培养基代替LB培养基,在经过优化的玉米浆培养基中培养TaraCRH菌株,经阿拉伯糖诱导,海因酶和水解酶酶活分别达到3.52和4.21 U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李强	清华大学化工系生物化工研究所	310	5294	38.0	67.0
2	丛进阳	清华大学化工系生物化工研究所	2	10	2.0	2.0
3	胡晓佳	清华大学化工系生物化工研究所	5	25	3.0	5.0