小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段的克隆及其GST融合蛋白的表达和纯化

• 作者: 刘彤 王欣 陈杰 陈莹
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: TSP2-3基因 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 454-457
• 页数: 4页
• 分类号: R135.2
• 字数: 3316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2006.05.003

摘要

目的:获取小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段,并高效表达和纯化GST-TSR2-3融合蛋白.方法:应用RT-PCR技术,从小鼠肺总RNA中,获得编码TSR2-3的基因片功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达重组的GST融合蛋白,亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定.结果:获得小鼠TSR2-3基因片段,测序结果与GenBank的基因序列一致,重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量39 kDa处,出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白.结论:成功克隆小鼠TSR2-3基因片段,并在E.coli BL21中高效表达,亲和层析后获得高纯度GST-TSR2-3融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈杰	中国医科大学公共卫生学院尘肺研究室	77	290	9.0	14.0
2	王欣	中国医科大学公共卫生学院尘肺研究室	80	425	11.0	17.0
3	陈莹	中国医科大学公共卫生学院尘肺研究室	46	215	8.0	12.0
4	刘彤	中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室	27	172	7.0	12.0