GST－NRP－1融合蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 张梦瑾 徐开林 徐杰 杜秀平 王红梅 陈翀 韩正祥
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NRP-1 原核表达 融合蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1370-1374
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.10.016

摘要

目的：构建带有GST标签的人NRP－1融合蛋白原核表达载体，在大肠埃希菌（ E．coli）中诱导其表达，并进行包涵体的复性及纯化。方法：利用RT－PCR扩增人NRP－1基因，将其克隆至pCR－blunt载体，酶切制备NRP－1基因片段，插入表达载体pGEX－4T－1，生成pGEX－4T－1－NRP－1，转入BL21感受态细胞以IPTG诱导其蛋白的表达。裂解细菌后行Western blot检测GST－NRP－1融合蛋白的表达，表达的包涵体经复性后用Glutathione Sepharose 4B纯化。结果：RT－PCR扩增出NRP－1基因并连入pCR－blunt载体；经亚克隆构建了融合蛋白表达载体pGEX－4T－1－NRP－1。转入BL21感受态细胞后考马斯亮蓝染色检测到GST－NRP－1融合蛋白的表达，经包涵体复性后得到纯化的融合蛋白。结论：成功构建带有GST标签的人NRP－1融合蛋白原核表达载体，为进一步研究NRP－1的结构、功能及其与之相互作用的蛋白奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩正祥	徐州医学院附属医院肿瘤科	80	423	12.0	14.0
2	徐开林	徐州医学院附属医院血液科	207	750	11.0	19.0
3	陈翀	徐州医学院附属医院肿瘤科	44	149	5.0	10.0
4	杜秀平	徐州医学院附属医院肿瘤科	69	327	10.0	13.0
5	王红梅	徐州医学院附属医院肿瘤科	21	73	5.0	7.0
6	徐杰	徐州医学院附属医院肿瘤科	4	10	2.0	3.0
7	张梦瑾	徐州医学院附属医院肿瘤科	3	12	1.0	3.0