口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型YNBS/58株P12A-3C转基因植物双元表达载体的构建

• 作者: 刘力宽 吕建亮 孙元 张永光 方玉珍 智晓莹 潘丽 王永录 王炜 蒋守田 黄振华
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 口蹄疫病毒 转基因植物 表达载体 农杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1059-1061,1064
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.11.014

摘要

目的 双元载体是目前转基因植物工程普遍应用的载体,本文将口蹄疫病毒P12A基因、3C基因串联,构建植物表达载体pBin-438P12A-3C.方法 为便于实验操作,本试验采用先将基因片段P12A、3C构建到一个中间质粒pcDNA3.1(+)的策略,构建成pcDNA3.1(+)-P12A-3C.结果 通过对构建好的pBin438-P12A-3C(Mini-Ti)重组质粒进行PCR鉴定和序列测定,证明中间表达载体构建成功.结论 通过三亲杂交法将重组质粒载体pBin438-P12A-3C导入到农杆菌GV3101,通过抗性筛选、PCR鉴定和序列测定,证明构建成功,与农杆菌中的help-Ti质粒共同组成植物双元表达载体,为以后的植物转化奠定基础.