人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达与初步纯化

• 作者: 沈大斌 罗福康 郑红 顾涛
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白 宿主菌 蛋白纯化 趋化因子 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（18）
• 所属期刊栏目: 医学检验专题
• 页码范围: 1638-1640
• 页数: 3页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3369字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2006.18.003

摘要

目的 确立人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达条件和初步纯化条件.方法 将pET32a(+)/SLC分别转化大肠杆菌AD494(DE3)、BL21trxB(DE3) 、BL21trxB(DE3)plusS,选择最佳宿主菌,优化诱导表达的条件,将大量表达的目的蛋白经金属离子亲和层析、除盐、肠激酶酶切、阳离子交换进行初步纯化.结果 pET32a(+)/SLC最佳宿主菌为BL21trxB(DE3),优化的表达条件为37℃、1mmol/L IPTG诱导3h,SDS-PAGE分析可见,表达蛋白的大小约为30kd,占菌体总蛋白的50%以上,可溶性蛋白约占50%.用SLC多克隆抗体进行Western blot分析显示,在30kd处出现单一阳性条带,而对照的pET32a(+)/BL21trxB(DE3)诱导菌则无此反应.SLC经一系列纯化步骤得到初步纯化.结论 初步建立pET32a(+)/SLC在宿主菌BL21trxB(DE3)中表达和纯化的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑红	第三军医大学西南医院综合实验研究中心	36	309	9.0	16.0
2	顾涛	第三军医大学西南医院综合实验研究中心	3	3	1.0	1.0
3	罗福康	第三军医大学新桥医院检验科	14	74	4.0	8.0
4	沈大斌	第三军医大学西南医院综合实验研究中心	5	8	2.0	2.0