大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建

• 作者: 邱鹏新 钟建辉 颜光美
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA多聚酶β 逆转录PCR TA克隆 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2-4
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2801字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.01.002

摘要

目的构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体.方法提取大鼠脑组织总RNA,用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183.酶切鉴定,重组腺病毒质粒(pAd-polb)和Lipofectamine2000转染293细胞,用293细胞扩增重组腺病毒.结果8个TA克隆中有2个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLB cDNA序列完全一致.DNA序列正确的POLB重组腺病毒质粒Ad-polb转染293细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光.结论用TA克隆和AdEasy系统,成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱鹏新	中山大学基础医学院药理学教研室	42	205	7.0	12.0
2	颜光美	中山大学基础医学院药理学教研室	38	166	7.0	10.0
3	钟建辉	中山大学基础医学院药理学教研室	2	2	1.0	1.0