马氏珠母贝ISSR-PCR反应条件优化

• 作者: 吕林兰 杜晓东 王嫣 王爱民 石耀华
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 马氏珠母贝 ISSR 优化 条件
• 年，卷（期）: 2006,（22）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 5806-5807,5855
• 页数: 3页
• 分类号: Q94
• 字数: 2987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.22.022

摘要

采用ISSR技术对马氏珠母贝进行PCR扩增,100个引物筛选出48个呈阳性反应的引物.对影响ISSR-PCR反应的Mg2+浓度、模板浓度、Taq酶浓度、引物退火温度和反应循环数进行了优化,并对甲酰胺对试验的影响进行了初步探讨.结果表明:优化的马氏珠母贝ISSR反应条件为①反应体系2.5μl 10×buffer,镁离子浓度1.5mmol/L,Taq酶1.0U,200nmmol/L ISSR引物,模板浓度为50ng/μl,2%甲酰胺,0.10mmol/L dNTP,加双蒸水至总体积25μl;②反应程序预变性94℃,5min;变性94℃,30s;退火52℃,1min;延伸72℃,2min;39个循环;延伸72℃,7min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嫣	海南大学海洋学院	18	160	8.0	12.0
3	杜晓东		123	1227	19.0	29.0
4	王爱民	海南大学海洋学院	48	866	17.0	29.0
6	吕林兰		35	300	10.0	15.0
9	石耀华	海南大学海洋学院	23	287	8.0	16.0