cTnI-linker-TnC融合蛋白基因的构建、表达及鉴定

• 作者: 卢仁泉 张明明 洪理泉 郑佐娅
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: cTnI-linker-TnC 融合蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: Q784|Q786
• 字数: 3990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2007.01.003

摘要

目的 重组及表达人cTnI-linker-TnC融合蛋白.方法 应用PCR技术从人心脏cDNA文库分别扩增出cTnI和TnC基因,通过引物设计在两者之间加上19个中性氨基酸残基TS-(G4S)3-AC的linker编码序列,克隆PCR产物,并构建pET28a-cTnI-linker-TnC表达质粒,转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达,NTA树脂亲和层析纯化后检测其纯度和免疫反应性.结果 成功构建了cTnI-linker-TnC融合蛋白的基因,并在大肠杆菌中实现可溶性高表达,在摇瓶中的表达量为21 mg/L,经一步NTA树脂亲和层析纯化,获得条带单一的目的蛋白,采用进口全自动免疫检测系统鉴定证实,目的蛋白有较高的免疫反应性.结论 采用原核表达方法可以获得具有高纯度和高免疫反应活性的cTnI-linker-TnC融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢仁泉	上海交通大学医学院医学检验重点实验室	5	28	4.0	5.0
2	郑佐娅	上海交通大学医学院医学检验重点实验室	10	36	5.0	5.0
3	张明明	上海交通大学医学院医学检验重点实验室	7	10	2.0	3.0
4	洪理泉	上海交通大学医学院医学检验重点实验室	1	7	1.0	1.0