绿色木霉TvALP-linker-TvRBL融合基因的构建与原核表达

• 作者: 徐杨玉 李海芬 李玲 梁炫强 温世杰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 绿色木霉 TvALP-linker-TvRBL融合基因 信号肽 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 131-137
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.01.020

摘要

在TvALP基因和TvRBL基因间加入一段柔性链接头（linker）基因序列，构建融合基因。生物信息学分析表明该融合基因含有一段信号肽序列。利用RT-PCR技术从绿色木霉菌丝体总RNA中扩增出TvRBL基因、TvALP基因和去除信号肽的?TvALP基因，分别克隆到原核表达载体pET30a，构建重组质粒pET30a-TvALP-linker-TvRBL和pET30a-?TvALP-linker-TvRBL，转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达。SDS-PAGE电泳分析结果表明，去除信号肽的表达质粒pET30a-?TvALP-linker-TvRBL在大肠杆菌BL21（DE3）pLysS中获得了表达，在60 kD处有一条蛋白质特异条带，与预测的目的产物蛋白条带大小一致。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玲	华南师范大学生命科学学院	173	2204	27.0	39.0
2	梁炫强	广东省农业科学院作物研究所	111	1027	19.0	27.0
3	李海芬	广东省农业科学院作物研究所	10	33	4.0	5.0
4	温世杰	广东省农业科学院作物研究所	20	227	6.0	15.0
5	徐杨玉	广东省农业科学院作物研究所	6	6	1.0	2.0