微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)的AOT反胶束纯化研究

• 作者: 周小华 王娟 骆辉
• 来源期刊: 天然产物研究与开发
• 学科: 生物学
• 关键词: 微生物转谷氨酰胺酶 AOT 反胶束 萃取
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 396-400
• 页数: 5页
• 分类号: Q814.1
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6880.2007.03.009

摘要

研究微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)反胶束纯化的工艺和条件,调节MTGase离心上清液等电点,除去部分杂蛋白,MTGase活力升高7.5倍;用截留分子量为10 000的超滤膜除去小分子杂蛋白,MTGase活力升高1.33倍;用0.05 mol/L的AOT/异辛烷反胶束进一步纯化MTGase,其最适萃取条件是粗MTGase蛋白质浓度20 mg/mL,[Na+] 0.12 mol/L,水相pH 4.80～5.20,相比1:1(v/v);荷载MTGase的AOT反胶束用2.0 mol/L KCl进行反萃取,MTGase活力为14.2 U/g,纯化8.875倍;冷冻干燥脱盐反萃取液,获得MTGase冻干粉,其活力为110.3 U/g,与粗酶液相比较,纯化689.4倍.经过AOT/异辛烷反胶束萃取纯化的MTGase,其SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条带.Ca2+与表面活性剂非极性尾上丁二酰羰基氧、极性头磺酸基硫氧基氧及MTGase分子表面具有孤电子对的基团的配位结合放大了AOT反胶束的另一种萃取作用--配位萃取,致使其对MTGase的萃取率高于K+而接近Na+.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周小华	重庆大学化学化工学院	55	410	13.0	18.0
2	王娟	重庆大学化学化工学院	11	37	4.0	5.0
3	骆辉	重庆大学化学化工学院	5	33	4.0	5.0