微生物谷氨酰胺转胺酶的乳糖诱导表达与纯化

• 作者: 何冬兰 叶程 尚敏邦 邵坤彦 黄俊
• 来源期刊: 中南民族大学学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷氨酰胺转胺酶 乳糖 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 26-32
• 页数: 7页
• 分类号: Q556
• 字数: 3057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4321.2012.03.008

摘要

对已构建的工程菌株pET22b-MTG/E.coli BL21（DE3）进行质粒酶切和PCR鉴定,优化诱导温度、时间、pH和乳糖浓度等反应条件,采用乳糖自诱导培养基培养重组菌.并将重组菌上清液经凝胶过滤,离子交换及镍柱亲和层析后,对谷氨酰胺转胺酶纯化和SDS-PAGE电泳分析.结果表明：谷氨酰胺转胺酶在28℃,添加乳糖为1.2g/L诱导18 h,pH为7.0,培养11.5 h时升温至50℃诱导1 h,再放至28℃培养,表达效果较好,超过IPTG诱导效果.纯化后酶活为7.5 U/mL,比活力为10.9 U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何冬兰	中南民族大学生命科学院生物工程实验室	48	170	7.0	10.0
2	黄俊	中南民族大学生命科学院生物工程实验室	7	40	4.0	6.0
3	邵坤彦	中南民族大学生命科学院生物工程实验室	6	12	2.0	3.0
4	叶程	中南民族大学生命科学院生物工程实验室	5	12	2.0	3.0
5	尚敏邦	中南民族大学生命科学院生物工程实验室	1	1	1.0	1.0