弓形虫MIC3基因真核表达质粒的构建及在 IBRS-2细胞内的表达

• 作者: 姚宝安 张东林 江涛 聂浩 赵俊龙
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 刚地弓形虫 MIC3 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 827-831
• 页数: 5页
• 分类号: S852.72|Q786
• 字数: 3304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.08.013

摘要

采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coli DH 5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1.然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDSPAGE、Western blot和ELISA检测表达情况.结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列(AJ132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcMIC3能在转染的IBRS-2细胞中表达分子量约为39.2ku的MIC3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江涛	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	49	168	8.0	11.0
4	姚宝安	华中农业大学动物医学院	39	195	8.0	11.0
5	聂浩	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	4	38	3.0	4.0
15	张东林	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	2	15	1.0	2.0