肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体的构建及体外生物学活性鉴定

• 作者: 冯凯 司少艳 张秀敏 李侠 隋延仿 韩瑞刚
• 来源期刊: 中国肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄球菌肠毒素A 超抗原 腺病毒 构建
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 536-540
• 页数: 5页
• 分类号: R73-36
• 字数: 4559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0242.2007.07.010

摘要

[目的]构建肝癌靶向性葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因重组腺病毒载体.[方法]首先利用现有的腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShuttle-CMV,构建新的不带CMV增强子/启动子而带有polyA加尾信号穿梭质粒,命名为pShuttle2.将AFP增强子、启动子及SEA基因分别从已构建的pKS-EP载体和pMDl8-T-SEA载体上,亚克隆至pShuttle2中,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coli BJ5183.以获得的重组子转染HEK293细胞后制备重组腺病毒,然后感染高表达AFP的肝癌细胞系Hepal-6和不表达AFP的黑色素瘤细胞系B16、成纤维细胞系NIH3T3.采用间接免疫荧光法,经荧光显微镜观察和流式细胞术检测SEA在细胞膜表面的表达.采用3H掺入法检测膜表达的SEA体外诱导淋巴细胞增殖的活性.[结果]SEA能够靶向性地表达在高表达AFP的Hepal-6细胞膜上,在不表达AFP的B16、NIH3T3细胞膜上不表达,并且体外能够诱导淋巴细胞增殖.[结论]成功地构建了肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体,为进一步研究SEA在肝癌靶向基因治疗中的应用及其抗肿瘤免疫机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	司少艳		51	214	7.0	11.0
2	李侠	第四军医大学基础部病理学教研室	63	249	8.0	11.0
3	隋延仿	第四军医大学基础部病理学教研室	88	384	10.0	13.0
4	张秀敏	第四军医大学基础部病理学教研室	53	243	8.0	11.0
5	冯凯		40	222	8.0	13.0
6	韩瑞刚		14	92	7.0	9.0