Taq Man-MGB探针Real-timePCR快速检测单增李斯特菌的研究

• 作者: 孟真 朱敏 梅玲玲 王晶 高筱萍
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 检测 Real-time荧光PCR Taq Man-MGB探针
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-213
• 页数: 3页
• 分类号: R378.99+4
• 字数: 3517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.02.008

摘要

目的:建立Taq Man-MGB探针Real-time荧光PCR快速检测单增李斯特菌技术.方法:在对单增李斯特菌invA序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性Taq Man-MGB探针法引物及探针,通过Real-timePCR反应条件和反应体系的优化,实现对单增李斯特菌的快速检测;用克隆到pMD18-T载体上的李斯特菌invA基因阳参片段及不同菌株、食品标本验证方法的特异性和敏感性.结果:方法的灵敏性高,其循环阈值与模板浓度的对数值具有很好的对应关系,最低可检测57个拷贝数,经18 h增菌,可检测低至4.5 cfu/ml的细菌;特异性强,检测6株单增李斯特菌标准株和100株单增李斯特菌样品分离株的PCR循环域值(CT值)均小于25,而90株威氏李斯特菌、英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌以及非李斯特菌PCR循环域值(CT值)大于35;快速,最快1 h可出结果,实际样品20 h可出结果,而常规细菌培养法需要一周以上;对103份速冻米面食品进行检测,13份阳性,与常规方法无显著性差异(P＞0.05).结论:Taq Man-MGB探针的单增李斯特菌Real-time荧光PCR检测方法具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,可推广应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅玲玲		83	735	14.0	25.0
2	孟真		44	258	10.0	13.0
3	朱敏		40	535	12.0	23.0
4	高筱萍		39	211	9.0	13.0
5	王晶		4	18	2.0	4.0