日本血吸虫嗜肌素样蛋白编码基因的克隆表达及其免疫原性研究

• 作者: 刘述先 徐馀信 曹建平 李小红 沈玉娟 童群波
• 来源期刊: 中国血吸虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 嗜肌素样蛋白 克隆 表达 免疫
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 247-251
• 页数: 5页
• 分类号: R383.24
• 字数: 4872字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6661.2007.04.002

摘要

目的 克隆和表达日本血吸虫嗜肌素样蛋白(SjcMLP)编码基因,并研究其重组抗原的免疫原性.方法 PCR扩增SjcMLP编码基因,并亚克隆入表达载体pQE30.将重组表达质粒pQE30-SjcMLP转入宿主菌E.coli M15,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用金属Ni螯合物亲和层析柱(Ni-NTA)纯化SjcMLP重组蛋白(reSjcMLP).纯化的reSjcMLP采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Western blot)作进一步分析.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定用reSjcMLP免疫C57BL/6小鼠血清中的抗体水平.结果 SDS-PAGE分析表明获得的重组抗原的大小约24.8 kDa,与预计的融合蛋白大小相符.Western blot显示该重组抗原能被日本血吸虫尾蚴感染兔血清识别.用该重组抗原包被进行ELISA检测,免疫血清滴度高达1:12800.但动物免疫试验结果减虫效果不明显.结论 SjcMLP编码基因以可溶性融合蛋白的形式得到表达,动物免疫试验未诱导出明显的保护力.