禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立

• 作者: 秦春香 谢丽基 谢芝勋
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 P17非结构蛋白 原核表达 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 777-782
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 6326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.09.011

摘要

用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增.扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞.经0.2 mmol/L IPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%.表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%.Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性.以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢芝勋		139	1616	23.0	31.0
2	谢丽基		73	730	16.0	23.0
3	秦春香	广西大学动物科技学院	4	29	3.0	4.0