人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

• 作者: 何蕴韶 刘洪涛 周国强 张志 李爱东 汪华侨 沈琪 邓英太 黄宗青
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 克隆 原核表达质粒
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 288-291
• 页数: 4页
• 分类号: R479.1
• 字数: 2451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2007.03.011

摘要

[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH.[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMDl8-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序.[结果]人PAH基因cDNA正确克隆人pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致.[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础.