紫色色杆菌苯丙氨酸羟化酶的异源表达及重组酶学性质研究

• 作者: 刘中美 周丽 周哲敏 崔文璟 曹淑慧
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 苯丙氨酸羟化酶 紫色色杆菌 表达 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 152-158
• 页数: 7页
• 字数: 5764字
• 语种: 中文

摘要

来源于紫色色杆菌（Chromobacterium violaceum）的苯丙氨酸羟化酶结构简单，性质更接近于人的苯丙氨酸羟化酶，具有潜在的医药应用价值。从紫色色杆菌基因组中克隆得到苯丙氨酸羟化酶基因pah。构建重组表达载体pET24a-pah，并在Escherichia coli BL21（DE3）中实现高效表达。离子层析纯化后，重组蛋白比酶活高达503.2 U/mg。酶学性质研究显示，该重组酶的最适温度为40℃左右，50℃时PAH的半衰期为15 min；最适pH在7.5左右，在pH6-8范围内较稳定。37℃，pH7.5条件下， Km值为1.5 mmol/L，Vmax为0.5 mmol/min，kcat为5.05/s，催化效率kcat/Km为3.37 L/mmol·s。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周丽	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	45	190	7.0	11.0
2	刘中美	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	27	48	4.0	6.0
3	周哲敏	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	53	108	5.0	6.0
4	崔文璟	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	29	77	6.0	7.0
5	曹淑慧	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	2	3	1.0	1.0