人类HBxAg蛋白反式激活基因5的原核表达及其蛋白纯化

• 作者: 伦永志 张黎颖 成军 洪源 蓝贤勇 郭江 陈宏 陶明亮
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙型肝炎病毒(HBV) X蛋白反式激活 XTP5基因(mHA-8)
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.10.004

摘要

为了更深入研究XTP5蛋白(也称人类次要组织相容性抗原(mHA-8))的生物学功能,以HepG2细胞总RNA为模板、应用RT-PCR技术获得XTP5基因,再利用基因工程技术对其进行克隆和原核重组表达载体构建和诱导表达,成功克隆XTP5基因,并成功构建原核重组表达空载体pET-32a(+)-XTP5;阳性重组质粒转化大肠杆菌E.coli BL21后,在37℃经终浓度1 mmoL/L IPTG诱导5 h后,受体菌大量表达76.88 ku XTP5重组蛋白;Western-blot证实宿主菌表达的蛋白特异性好;肝素亲和层析柱纯化表达产物XTP5蛋白效果良好.结果表明,成功克隆了人类XTP5基因,并获得纯度较高的融合蛋白XTP5.