猪瘟病毒p80基因丝氨酸蛋白酶功能区的原核表达及小鼠免疫试验

• 作者: 张彦明 张淼涛 李少方 许信刚 鲁絮
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 p80基因 原核表达 免疫
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: S852.651
• 字数: 3430字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2007.06.003

摘要

根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb.将p80基因中的丝氨酸蛋白酶基因克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒pET-p80.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达得到分子量约为43ku的目的蛋白,与理论大小相符.将菌体蛋白经Ni柱纯化,获得纯化重组p80蛋白,Western blot检测表明,表达的目的蛋白能与CSFV阳性血清发生反应.用纯化的p80蛋白免疫Bal b/c小鼠,成功制备了抗p80蛋白的抗血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物科技学院	256	1530	16.0	24.0
2	张淼涛	西北农林科技大学动物科技学院	41	316	10.0	17.0
3	许信刚	西北农林科技大学动物科技学院	116	501	10.0	14.0
4	鲁絮	中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室	1	0	0.0	0.0
8	李少方	西北农林科技大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0