CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定

• 作者: 张艳红 张部昌 赵聪 马清钧
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱毒素B亚单位 大肠杆菌热稳定肠毒素 大肠杆菌O157:H7 疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 208-213
• 页数: 5页
• 分类号: R996.1|R378.21
• 字数: 4729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2007.03.003

摘要

目的:表达霍乱毒素B亚单位(CTB)和大肠杆菌突变的热稳定肠毒素(mST)的融合蛋白,并进行抗原性和免疫原性的分析.方法:通过连接肽(linker)将CTB基因和串连的mST连接,然后插入表达载体pET-22b(+),获得克隆,经IPTG诱导获得CTB-mST2融合蛋白.采用多因素正交优选法优化了培养基及培养条件,对表达产物进行包涵体复性后,经过亲合层析纯化得到融合蛋白,并对该融合蛋白抗原性和免疫原性进行了分析.结果与结论:构建了高效表达工程菌,经摇瓶培养,在优化培养基及培养条件下融合蛋白表达量可达320 mg/L,占总蛋白40%.融合蛋白免疫小鼠,可获得高滴度抗CTB和ST血清;将融合蛋白与灭活的O157∶ H7菌体组合免疫小鼠,可产生对O157∶ H7毒株攻击的保护力.本研究可为构建抗ETEC和EHEC复合疫苗提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马清钧	军事医学科学院生物工程研究所	147	1208	18.0	29.0
2	张艳红	军事医学科学院生物工程研究所	25	61	4.0	6.0
3	张部昌	安徽大学生命科学学院	82	550	12.0	20.0
4	赵聪	军事医学科学院生物工程研究所	2	3	1.0	1.0