肠球菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 任月 卢行安 岳慧 袁杰利
• 来源期刊: 中国微生态学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠球菌 荧光定量PCR 粪便
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 413-416
• 页数: 4页
• 分类号: R378.992
• 字数: 3890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-376X.2007.05.006

摘要

目的 利用TaqMan荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测.方法 根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针[1];利用构建的质粒标准品优化Mg2+的浓度和引物探针浓度,并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性;初步应用于粪便标本的检测分析.结果 Mg2+终浓度为4.5 mmol/L,上下游引物终浓度为0.4 μmol/L,灵敏度为6拷贝数/反应;绘制两种标准曲线,构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型,检测粪便标本结果显示TaqMan荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便.结论 本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁杰利	大连医科大学微生态教研室	105	1457	23.0	32.0
2	卢行安		28	429	11.0	20.0
3	任月	大连医科大学微生态教研室	5	55	4.0	5.0
4	岳慧	宁夏大学农学院	3	5	1.0	2.0