H5N1亚型AIV NS1基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 侯勇跃 刘威龙 刘畅 焦培荣 陈化兰
• 来源期刊: 畜牧与饲料科学
• 学科: 医学
• 关键词: H5N1亚型禽流感病毒 非结构蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 21-23
• 页数: 3页
• 分类号: R373.1
• 字数: 1942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5190.2007.04.015

摘要

根据已测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列,设计并合成一对特异性引物NS1U/NS1L,利用RT-PCR方法扩增出该毒株的NS1基因.将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,通过酶切分析及序列测定,鉴定出了NS1基因片段的阳性重组子.转化BL21大肠杆菌感受态细胞后,经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,成功表达出大小约45.0 kD的NS1融合蛋白,表达产物主要存在于包涵体中.用Western-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别.