OTX1基因慢病毒载体的构建及过表达研究

• 作者: 任萍 关云谦 张愚 徐艳玲 王淑艳
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒 OTX转录因子 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-21
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 4957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.01.004

摘要

OTX1基因是神经发育调控中关键转录因子之一.实验构建表达OTX1基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导OTX1基因体外过表达的可行性.将OTX1基因克隆到慢病毒穿梭质粒DUET101内,构建表达OTX1以及GFP-OTX1基因的慢病毒载体;将pDUET-OTX1、pDUET-GFP-OTX1及pDUET101(空载体对照)质粒分别与慢病毒包装质粒pCMV△R8.91、pMD.G共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带OTX1基因、GFP-OTX1基因的重组慢病毒DUET-OTX1、DUET-GFP-OTX1以及仅携带GFP基因的DUET-GFP;用重组慢病毒分别转导293T细胞、SY5Y细胞、小鼠胚胎干细胞及大鼠胚胎15天皮层神经干细胞,证实慢病毒载体能够将外源基因转导入不同细胞,且转导的OTX1或GFP-OTX1在不同细胞中均仅在细胞核内表达;培养OTX1单克隆抗体细胞,浓缩抗体上清,通过Western blot以及细胞免疫荧光法证实慢病毒介导的OTX1基因及GFP-OTX1基因转导入293T细胞后的过表达.证实了慢病毒载体是高效的基因转移载体;OTX1作为发育过程中至关重要的转录因子,经过重组慢病毒体外转导后均只在细胞核内表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张愚	首都医科大学宣武医院细胞治疗中心	57	235	8.0	12.0
2	关云谦	首都医科大学宣武医院细胞治疗中心	44	200	8.0	12.0
3	王淑艳	首都医科大学宣武医院细胞治疗中心	18	33	3.0	5.0
4	徐艳玲	首都医科大学宣武医院细胞治疗中心	11	66	5.0	8.0
5	任萍	首都医科大学宣武医院细胞治疗中心	5	18	2.0	4.0