携带人PPARγ1受体基因高效真核表达载体的构建及其意义

• 作者: 万敬员 周岐新 李苌清 杨俊卿 章涛 蒋建新
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体γ1 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 125-127,130
• 页数: 4页
• 分类号: R34|R966
• 字数: 3404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2007.02.005

摘要

目的:构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(hPPARγ1)的真核表达载体,为hPPARγ1受体功能和基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选提供分子研究平台.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARγ1全长基因,与经XhoⅠ、SmaⅠ相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARγ1-IRES2-EGFP,经酶切及测序鉴定重组质粒中hPPARγ1基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARγ1的表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测.结果:经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARγ1的高效表达.结论:成功构建phPPARγ1-IRES2-EGFP重组质粒,为基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选平台的建立及受体功能研究提供了高效表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万敬员	重庆医科大学药理学教研室	67	331	11.0	14.0
2	章涛	重庆医科大学药理学教研室	11	36	3.0	6.0
3	杨俊卿	重庆医科大学药理学教研室	118	709	14.0	22.0
4	蒋建新	第三军医大学创伤烧伤与复合伤国家重点实验室	76	736	15.0	24.0
5	周岐新	重庆医科大学药理学教研室	190	1564	18.0	29.0
6	李苌清	重庆医科大学药理学教研室	9	113	5.0	9.0