树鼩脂蛋白脂肪酶的cDNA克隆、组织分布及活性测定

• 作者: 刘惠荣 吴钢 周冰 孙国涛 曾武威 薛红 陈保生
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子生物学 脂蛋白脂肪酶 组织分布 酶活性 甘油三酯 树鼩
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 801-804
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 3676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2007.11.001

摘要

目的 了解不易感动脉粥样硬化动物树鼩的脂蛋白脂肪酶的结构和活性特点,并与其它种属比较,探讨脂蛋白脂肪酶在树鼩独特脂代谢中的作用.方法 以树鼩脂肪细胞mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术获得树鼩脂蛋白脂肪酶的cDNA序列并推导出其氨基酸序列;实时定量PCR方法检测树鼩脂蛋白脂肪酶mRNA在各组织中的分布;真核表达树鼩和人脂蛋白脂肪酶蛋白,放射性同位素法测定二者的活性并比较.结果 树鼩脂蛋白脂肪酶cDNA序列全长为3293 bp,其中编码区1437 bp,编码20个氨基酸的信号肽和458个氨基酸的成熟蛋白,该成熟蛋白N-端比人脂蛋白脂肪酶多10个氨基酸.树鼩脂蛋白脂肪酶与其它哺乳类动物的氨基酸序列同源性大于90%,功能域高度保守.树鼩脂蛋白脂肪酶的组织表达谱比较广泛,在心肌和脂肪组织中大量表达,但在骨骼肌中未检测到,却在肝脏中有中低水平表达,与人脂蛋白脂肪酶在这两种组织中的表达相反.活性测定结果显示,树鼩脂蛋白脂肪酶活性显著高于人(7.67倍),这与测定的树鼩血浆低甘油三酯水平相符.结论 树鼩的高活性脂蛋白脂肪酶可能是其血浆低水平甘油三酯的主要原因.