B组轮状病毒WH-2株vp7基因的原核表达与抗体的制备

• 作者: 尹素改 杨继红 王娜 胡英会 芦宝静 陈强
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B组轮状病毒 vp7基因 克隆 GST融合蛋白表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 807-809
• 页数: 3页
• 分类号: R373
• 字数: 3321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.05.017

摘要

目的:在大肠杆菌中表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白并制备其兔抗血清.方法:根据B组轮状病毒(GBRV)WH-2株vp7基因的全序列设计引物,用PCR的方法扩增得到vp7基因的编码区.将其克隆到原核GST融合表达载体pGEX-KG内,转化大肠杆菌E. coliDH5α,IPTG诱导表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白,经SDS-PAGE分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白抗血清.结果:经鉴定确认,vp7基因以正确的方式插入到载体中,此重组表达载体经IPTG诱导后,可表达相对分子量为53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白.制备的抗血清经同样诱导表达的表达载体pGEX-KG表达产物吸收后1:500倍稀释后用Western Blot分析,与53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白获得特异性显色信号.结论:人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白成功在大肠杆菌中GST融合表达,所表达的蛋白和制备的抗体不但为研究结构与功能提供了物质基础,也为GBRV所引起的疾病预防、诊断和治疗等流行病学研究和临床诊断奠定了基础,具有重要实际应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨继红	华中师范大学生命科学院	20	121	5.0	10.0
2	陈强	华中师范大学生命科学院	12	76	4.0	8.0
3	王娜	华中师范大学生命科学院	13	22	2.0	4.0
4	胡英会	华中师范大学生命科学院	1	2	1.0	1.0
5	芦宝静	中国科学院武汉病毒研究所	1	2	1.0	1.0
6	尹素改	中国科学院武汉病毒研究所	1	2	1.0	1.0