真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染小鼠对移植胰岛功能的影响

• 作者: 刘永锋 孙宏治 张佳林 张金祥 程颖 许国岩 赵国华 赵宁 钟鑫平
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛移植 排斥反应 共刺激信号 B7/CD28
• 年，卷（期）: 2007,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1596-1601
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4719字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.14.004

摘要

目的:探讨真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染受体小鼠肌细胞后对胰岛移植后排斥反应的影响.方法:受体C57BL/6小鼠随机分为对照组、空白转染组和实验组(转染pcDNA3-CTLA4Ig).Western blot检测受体小鼠血清CTLA4-Ig表达,观察移植物存活时间,术后7 d取受体肾脏做HE染色及胰岛素免疫组化染色,采用微量全血3H-胸腺嘧啶掺入法检测单个核细胞在刀豆蛋白A刺激下的增殖程度,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群表达情况.结果:受体小鼠转染5 d后,Western blot检测到血清内有CTLA4Ig表达,转染效率为27.50%;实验组小鼠血糖维持正常时间明显延长(P＜0.05);术后7 d,转染组单个核细胞在刀豆蛋白刺激下的增殖程度明显降低(P＜0.05),CD4+、CD8+T淋巴细胞表达与对照组和空白转染组相比有显著差异差异(CD4+:14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%,21.04%±1.14%,P＜0.05;CD8+:14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%,23.84%±1.21%,P＜0.05),小鼠肾被膜下胰岛素免疫组化染色强度明显增高.结论:利用脂质体法可将pcDNA3-CTLA4Ig转染到活体小鼠肌细胞内并在小鼠体内表达CTLA4Ig,从而阻断B7/CD28共刺激信号途径,抑制胰岛移植术后排斥反应.