shRNA表达载体pWH1的构建及用于HIF1基因的沉默

• 作者: 吴元明 张晓楠 李春英 陈南春 韩者艺
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: shRNA 表达载体 RNA干涉 HIF1基因
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 115-118
• 页数: 4页
• 分类号: R344.11
• 字数: 3669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.02.005

摘要

目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpin RNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducible Factor-1,HIF1)基因的沉默效果.方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中,此载体命名为pWH1.以人HIF1 cDNA基因为靶标设计引物,退火后克隆入pWH1.新的载体转染SGC7901细胞,然后用RT-PCR和Western blot检测HIF1基因的表达改变.结果:构建的pWH1载体能很好地表达针对HIF1基因的shRNA,RT-PCR和Western blot的结果显示HIF1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下降.结论:成功构建了shRNA表达载体pWH1,这对于基因的功能研究具有重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李春英	第四军医大学西京医院皮肤科	129	577	11.0	18.0
2	陈南春	第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室	58	283	8.0	13.0
3	张晓楠	第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室	47	317	9.0	16.0
4	韩者艺	第四军医大学西京医院全军消化病研究所	23	184	8.0	13.0
5	吴元明	第四军医大学基础部病理学与病理生理学教研室	38	207	6.0	12.0