重组水稻几丁质酶的发酵生产、纯化及酶学性质

• 作者: 丁东风 侯建华 关文强 吴仲 李明刚 阎瑞香
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 重组几丁质酶 基因工程菌 发酵 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 148-153
• 页数: 6页
• 分类号: S182
• 字数: 3938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.01.028

摘要

用7L发酵罐对毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌株NB01进行了重组几丁质酶的诱导表达,通过提高通气量和调整搅拌转速,使溶氧维持在30%以上,NB01可在发酵84 h内达到产酶高峰,酶活最高可达48.0795 U/mL.利用中空纤维超滤膜对发酵液浓缩、提纯,再经过Sephadex G-100柱层析后得到单一组分的重组几丁质酶,酶纯度提高了7.9961倍.重组几丁质酶在60℃以下具有良好的热稳定性,在pH 2～6范围内有较强的耐受力,在4℃条件下贮藏具有较好的稳定性.