病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化

• 作者: 张增艳 董娜 辛志勇
• 来源期刊: 植物遗传资源学报
• 学科: 农学
• 关键词: ERF(ethylene-responsive factor) TaERF1b 原核蛋白表达 包涵体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 283-287
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 字数: 3720字
• 语种: 中文

摘要

为了得到纯化的TaERF1b活性蛋白,将TaERF1b基因含有AP2/ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERF1b融合蛋白表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.0.1mmol/L IPTG即能诱导融合蛋白表达,37℃诱导4h或30℃诱导8h,融合蛋白均以包涵体的形式表达,16℃诱导12h,融合蛋白不表达.包涵体经溶解及稀释复性后,过GST亲和层析柱,获得纯化的融合蛋白,考马斯亮蓝法测得纯化蛋白的浓度约为0.5μg/μl,凝胶阻滞实验表明包涵体复性成功,所得蛋白具有生物活性.